核酸提取（核酸提取方法介绍）

核酸提取(核酸提取方法介绍)

核酸是由许多核苷酸聚合而成的生物大分子化合物，是生命中最基本的物质之一。核酸存在于所有动物细胞、植物细胞、微生物和活生物体中的核酸经常与蛋白质结合形成 *** 白。不同核酸的化学组成和核苷酸序列是不同的。核酸主要包括RNA(核糖核酸)和DNA(脱氧核糖核酸)，其优优资源 *** 中的DNA是储存、复制和传递遗传信息的主要物质基础。

核酸提取的原则首先是保证核酸一级结构的完整性，其次是消除其他分子的污染。

提取核酸时，要注意简化步骤，缩短提取时间；减少化学因素对核酸的降解；减少物理因素对核酸的降解:机械剪切力和高温；阻止核酸的生物降解。

核酸提取大致可以分为三个部分:片段化、提取和纯化。

细胞裂解法

1.物理方法:煮沸法、玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法、均质法。

2.化学方法:表面活性剂(SDS法)和碱裂解法。

3.生物方式:酶法(溶菌酶、蛋白酶K等。)

常见样品提取方法概述

盐法:利用RNA和DNA在盐溶液中溶解度的不同来分离它们。

有机溶剂提取:有机溶剂作为蛋白质变性剂，同时抑制核酸酶的降解。

梯度离心:利用不同内容物密度不同的原理，分离各种内容物。

材料结合法:①高盐低PH值的硅质材料结合核酸，低盐高PH值洗脱；②低盐高PH值阴离子交换树脂结合核酸，高盐低PH值洗脱；③包被不同基因的磁珠可以吸附不同的物体，从而达到分离的目的。

胍萃取结合硅胶吸附法

硅胶具有特异性吸附核酸的特性，异硫氰酸胍可以裂解细胞。因此，在高浓度异硫氰酸胍的存在下，从细胞中释放的核酸成分，包括细菌或病毒颗粒，可以与二氧化硅结合。利用这一特性，可以提取血液和尿液中的DNA和RNA。

表达RNA快速提取试剂

仙达基因RNA快速提取试剂可在5min内从组织、血液、拭子、细胞等不同小微样本中快速提取和纯化病毒RNA。从产物中提取的RNA可直接用于核酸扩增和检测、体外逆转录、基因克隆、文库构建、杂交等多种生物学实验和研究。

离心柱萃取

离心柱技术是一种比较简单的分离纯化微量核酸的方法，属于硅吸附法的一种。原则上，它可以分为三个部分:

(1)使用裂解物促进细胞破碎并释放细胞中的核酸。

②释放的核酸特异性吸附在特定的硅载体上。这种载体只对核酸有很强的亲和力和吸附力，基本不吸附蛋白质、多糖、脂类等其他生化成分，所以离心时被甩出柱外。

(3)用洗脱剂洗脱吸附在特定载体上的核酸，分离得到纯化的核酸。

磁珠法

根据与硅胶膜离心柱相同的原理，利用纳米技术对超顺磁性纳米粒子的表面进行了改进和修饰，进而制备了超顺磁性二氧化硅纳米粒子。磁珠可以在微观界面上特异性识别并高效结合核酸分子。利用二氧化硅纳米球的超顺磁性，在离液盐(盐酸胍、异硫氰酸胍等)的作用下，可以从血液、动物组织、食品、病原微生物等样品中分离出DNA和RNA。)和外部磁场。可应用于临床疾病诊断、输血安全、法医鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、分子生物学研究等领域。

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